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1.材料与方法
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动物分组
选用昆明种小鼠6只(雌雄各半),供传代用。选用昆明种小鼠140只(雌雄各半),按体重随机分为正常对照组(A组,n=20)、肝癌模型组(B组,n=30)、人参皂苷Rg3组(C组,n=30)、5-氟尿嘧啶(5-FU)组(D组,n=30)、人参皂苷Rg3联合5-FU组(E组,n=30)。
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给药方法
造模24h后开始给药,持续给药10d。正常对照组(A组)以生理盐水每只每日0.2mL灌胃,肝癌模型组(B组)以生理盐水每只每日0.2mL灌胃,人参皂苷Rg3组(C组)以人参皂苷Rg3(用生理盐水配成混悬液)5mg/(kg·d)灌胃,5-Fu组(D组)以5-Fu20mg/(kg·d)腹腔注射,人参皂苷Rg3联合5-Fu组(E组)以人参皂苷Rg35mg/(kg·d)灌胃、5-Fu20mg/(kg·d)腹腔注射,均每日1次。
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检测指标与方法
给药10d后,断颈处死各组动物,A组切取部分肝组织,其余各组切取肝肿瘤组织,固定于10%中性甲醛溶液中,12h后常规脱水、透明、石蜡包埋、切片,烘箱内烘干后备用。
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统计学处理
采用SAS6.12统计软件进行分析,计数资料比较采用X2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2.结果
Survivin免疫组化检测及图文分析结果见表1及图1。A组小鼠肝组织内未见Survivin表达;各组小鼠肝癌组织Survivin表达水平比较,C组、D组、E组均明显低于B组(P<0.05),E组明显低于C组和D组(P<0.05),而C组与D组无明显差异(P>0.05)。


(点击图片,查看大图)
3.结论
在本研究中,设立了人参皂苷Rg3单独应用组,以观察其作用。本研究结果证实,Survivin与肝癌细胞凋亡密切相关,Survivin高水平表达和caspase-3低水平表达能抑制肝癌细胞的凋亡;将人参皂苷Rg3和5-FU联合应用,诱导肝癌细胞凋亡的作用明显优于两药单独应用。结果提示,两药联合应用具有协同促进作用,能增强抗肿瘤作用。总之,Survivin为近年来发现的凋亡抑制因子,可通过调节细胞凋亡而在肿瘤的形成及发展过程中发挥重要作用,但具体机制尚不清楚。无论在分子水平、亚细胞水平还是细胞水平上,对其进行深入的研究都具有重要的意义。
参考文献:中国药业,2014年12月20日第23卷第24期。
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